血清胰岛素测定方法主要有放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、化学发光免疫分析法、高效液相色谱法,选择时需考虑实验室条件、检测目的等,检测时应注意标本采集、质量控制、参考区间等。
1.放射免疫分析法(RIA)
利用放射性同位素标记的胰岛素与未标记的胰岛素竞争结合特异性抗体,通过测定放射性来计算胰岛素的含量。
2.酶联免疫吸附法(ELISA)
将胰岛素固定在固相载体上,然后加入待检血清和酶标胰岛素抗体,形成抗体-胰岛素-酶标抗体复合物,再加入底物显色,通过测定吸光度来计算胰岛素的含量。
3.化学发光免疫分析法(CLIA)
利用化学发光物质标记胰岛素抗体,待检血清中的胰岛素与标记抗体结合,形成免疫复合物,通过检测化学发光信号来计算胰岛素的含量。
4.高效液相色谱法(HPLC)
将血清样品通过色谱柱进行分离,然后用特定的检测方法检测胰岛素的峰面积,从而计算胰岛素的含量。